骨保护素、核因子-κB受体活化因子配基在氟砷联合染毒大鼠骨骼毒性中的调控作用

作者: 李浩 覃子秀 王冰洁 胡君伟 洪峰

关键词: 氟 亚砷酸盐类 骨保护素 核因子κB受体活化因子 大鼠 骨和骨组织

摘要:目的 探讨骨保护素(OPG)与核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)在氟砷联合染毒大鼠骨骼毒性中的调控作用.方法 选取192只8周龄清洁级Wistar大鼠,体重为(200±50)g,根据2×4析因实验设计按体重采用随机数字表法分成16组,每组12只,雌雄各半.用氟化钠(NaF,空白对照0.0 mg/kg、低氟5.0mg/kg、中氟10.0 mg/kg、高氟20.0 mg/kg)和亚砷酸钠(NaAs02,空白对照0.0 mg/kg、低砷2.5 mg/kg、中砷5.0mg/kg、高砷10.0 mg/kg)灌胃染毒6个月.依据上述处理因素将大鼠分为对照组(F0As0)、低氟组(F5.0As0)、中氟组(F10.0As0)、高氟组(F20.0As0)、低砷组(F0As2.5)、中砷组(F0As5.0)、高砷组(F0As100)、低氟低砷组(F5.0As2.5)、低氟中砷组(F5.0As5.0)、低氟高砷组(F5.0As100)、中氟低砷组(F10.0As2.5)、中氟中砷组(F10.0As5.0)、中氟高砷组(F10.0As10.0)、高氟低砷组(F200As2.5)、高氟中砷组(F20.0As5.0)、高氟高砷组(F20.0As10.0).采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测大鼠骨组织中OPG及RANKL蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测OPG及RANKL mRNA表达水平.结果 与F0As0组[(2.678±0.136)ng/mg、(29.658±0.662)pg/mg]比较,F5.0As0、F10.0As0、F20.0As0组骨组织中OPG[(2.857±0.162)、(2.983±0.272)、(3.117±0.143)ng/mg]、RANKL[(32.533±0.999)、(32.698±1.932)、(33.331±1.140)pg/mg]蛋白表达水平随染氟剂量的升高均有升高趋势;与F0As0组比较,F0As2.5、F0As5.0、F0As10.0组骨组织RANKL蛋白水平[(32.348±2.838)、(31.589±1.359)、(28.843±1.908)pg/mg]随染砷剂量的升高而先升高后下降(P均< 0.05).与F0As0组(0.83±0.19、0.92±0.23)比较,F5.0As0、F10.0As0、F20As0组骨组织OPG(1.14±0.27、1.33±0.39、1.69±0.77)、RANKL mRNA水平(1.02±0.21、1.17±0.15、1.25±0.31)随染氟剂量的升高均有升高趋势.氟对OPG、RANKL蛋白和mRNA的表达有主效应(F=11.530、21.765、6.320、3.543,P均< 0.05),氟砷联合对RANKL蛋白和mRNA、OPG蛋白表达存在交互拮抗作用(F=9.496、2.217、3.375,P均< 0.05).结论 氟砷联合染毒对大鼠骨组织RANKL及OPG的影响中氟起主导作用,砷间接参与了氟致大鼠骨骼毒性作用,氟砷联合对OPG及RANKL表达的交互作用主要表现为拮抗作用.


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